反相鍵合相液相色譜儀流動(dòng)相溶劑極性越低,洗脫能力越強(qiáng)。
一、常用流動(dòng)相:
1、甲醇-水。
2、乙腈-水。
3、四氫呋喃-水。
溶劑強(qiáng)度為水<甲醇<乙腈<四氫呋喃。
系統(tǒng)2較系統(tǒng)1好,原因如下:
系統(tǒng)2的粘度較系統(tǒng)1小,柱效好。粘度降低,柱壓降低,傳質(zhì)阻力降低(溶質(zhì)擴(kuò)散阻力降低), 柱效升高。
乙腈的紫外末端吸收較甲醇小,在低波長(zhǎng)處測(cè)定時(shí),基線波動(dòng)較甲醇小,測(cè)定誤差小。
二、流動(dòng)相的選擇:
1、二元溶劑系統(tǒng):
一般以洗脫能力最弱的水作為底劑,再加入一定量的可與水互溶的有機(jī)極性調(diào)節(jié)劑。常用的首選極性調(diào)節(jié)劑為甲醇和乙腈。
2、多元溶劑系統(tǒng):
在二元溶劑系統(tǒng)中加入少量的四氫呋喃,常能改善某些難分離的物質(zhì)對(duì)的分離度。
用水、甲醇、乙腈和四氫呋喃組成三元或四元溶劑系統(tǒng),并進(jìn)行優(yōu)化,選出最佳溶劑系統(tǒng)。
三、溶質(zhì)保留值隨溶劑極性變化的一般規(guī)律:
有機(jī)溶劑比例減。
1、溶劑的極性增加,洗脫能力降低,溶質(zhì)的保留時(shí)間增加。
2、不同溶質(zhì)組分間的分離度增加。
3、溶質(zhì)的柱效降低。
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