離子交換鍵合相色譜儀流動相多為一定pH值的緩沖液，有機成分作改性劑。

一、溶質保留機理：

兼有離子交換和吸附雙重機理。

二、影響溶質保留值的因素：

1、流動相的pH值：

（1）弱酸和弱堿的保留值與洗脫液的pH值有關。

解離并參加離子交換而被分離。

不解離，不參加離子交換，以分子形式幾乎無保留地通過色譜柱。

流動相的pH值選擇應適中，最好選擇在被分離的酸或堿的pk_a或pk_b附近，使其解離適中，達到最佳分離。

采用不同pH值的緩沖液進行梯度洗脫，可提高分離度。例如陰離子交換，pH值降低，酸性弱的組分先洗脫出，酸性強的組分后洗脫出。

（2）陰離子交換劑分離有機酸的保留規(guī)律：

在用強陰離子交換鍵合相分離酸性藥物時，pH值增大，藥物解離度增大，k值增大，保留時間增加。

pH值越小，酸的解離被抑制，保留越小。

pH值越大，酸的解離程度越大，保留越強。

（3）陽離子交換劑分離有機堿的保留規(guī)律：

在用強陽離子交換鍵合相分離堿性藥物時，pH值增大，游離堿增加，k值減小，保留時間縮短。

pH值高，堿以分子形式存在，保留值很小。

pH值低，堿以質子化形式存在，保留值較大。

2、流動相的離子強度：

流動相的離子強度（緩沖鹽濃度）增加，k減小。原因是離子交換平衡的移動。

3、有機改性劑：

如果洗脫液中加入極性有機組分（如乙醇），則抑制離子交換，產生按分配機理進行的分離。

   

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