等電聚焦電泳色譜儀是利用蛋白質(zhì)分子或其它兩性分子的等電點(diǎn)不同,在一個(gè)穩(wěn)定的、連續(xù)的和線性的pH梯度中進(jìn)行分離,具有靈敏度高、分辨率高和重復(fù)性好等特點(diǎn),特別適合大批量純度檢測(cè)和真實(shí)性鑒定以及遺傳多樣性等群體生物學(xué)領(lǐng)域的研究。pH梯度按形成方式可分為載體兩性電解質(zhì)pH梯度和固相pH梯度等。
一、載體兩性電解質(zhì)pH梯度:
載體兩性電解質(zhì)pH梯度的介質(zhì)是兩性分子,在電場(chǎng)中遷移到自己的等電點(diǎn)后自然形成pH梯度。
二、固相pH梯度:
固相pH梯度等利用一系列具有弱酸或弱堿性質(zhì)的丙烯酰胺衍生物滴定時(shí),在滴定終點(diǎn)附近形成pH梯度并參與丙烯酰胺的共價(jià)聚合,形成固定的、不隨環(huán)境電場(chǎng)條件變化的pH梯度,分辨率可達(dá)0.001pH。
三、載體兩性電解質(zhì)與固相pH梯度混合技術(shù):
即在固相pH梯度凝膠中加入載體兩性電解質(zhì)作為添加劑,被稱為雜交等電聚焦。
載體兩性電解質(zhì)pH梯度與固相pH梯度的區(qū)別在于,前者是兩性分子,在電場(chǎng)中兩性分子遷移到自己的等電點(diǎn)而形成pH梯度;后者不是兩性分子,在凝膠聚合時(shí)便形成pH梯度。
來(lái)源:http://www.fudizao.com