影響高效毛細(xì)管電泳色譜儀譜帶展寬的因素有焦耳熱、擴(kuò)散和吸附等。

一、焦耳熱：

電流通過(guò)毛細(xì)管內(nèi)的緩沖液時(shí)產(chǎn)生的自熱稱為焦耳熱。

焦耳熱通過(guò)管壁向周圍環(huán)境散熱，管中心溫度最高，由中心向管壁溫度逐漸下降。溫度高，粘度小，因而管中心的組分遷移最快，管壁附近的組分遷移最慢，破壞了溶質(zhì)帶的扁平塞子流型，導(dǎo)致譜帶展寬。

大內(nèi)徑毛細(xì)管，電阻小，電流大，產(chǎn)生的焦耳熱多，且不易散熱。小內(nèi)徑毛細(xì)管散熱面積大，溫度梯度小，譜帶展寬小。但內(nèi)徑過(guò)小會(huì)帶來(lái)進(jìn)樣和檢測(cè)等困難，又易造成柱堵塞。因此，目前多采用內(nèi)徑25～75μm的毛細(xì)管。

二、擴(kuò)散：

擴(kuò)散是物質(zhì)分子由高濃度區(qū)域自發(fā)遷移到低濃度區(qū)域的過(guò)程。擴(kuò)散會(huì)引起譜帶展寬。

擴(kuò)散系數(shù)小的物質(zhì)，譜帶展寬較小。

三、吸附：

溶質(zhì)與毛細(xì)管壁之間存在吸附和疏水作用，使遷移速度減慢，造成譜帶展寬。

造成管壁吸附的主要原因：

1、電解質(zhì)溶液pH＞3時(shí)，石英毛細(xì)管壁帶負(fù)電荷，因靜電引力，溶質(zhì)陽(yáng)離子被管壁吸附。

2、蛋白質(zhì)和多肽帶電荷數(shù)多，有較多的疏水基，疏水作用較強(qiáng)，是目前分離分析該類物質(zhì)的一大難題。在pH＜3時(shí)，管壁呈電中性時(shí)尤為明顯。

小內(nèi)徑毛細(xì)管有利于散熱，但比表面積大（柱內(nèi)表面積和體積之比），會(huì)使吸附增加，引起譜帶展寬大。

   

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